(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111607640.5 (22)申请日 2021.12.27 (71)申请人 北京大学 地址 100871 北京市海淀区颐和园路5号 (72)发明人 尹艳慧　刘泽钰　徐丽娟　李明慧　 (51)Int.Cl. C07K 14/725(2006.01) C12N 15/12(2006.01) C12N 15/867(2006.01) C12N 5/10(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61K 45/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种特异识别癌/睾 丸抗原HCA587/MAGEC2 的T细胞受体及其应用 (57)摘要 本发明提供了特异识别癌/睾丸抗原 HCA587/MAGEC2的T细胞受体(TCR)及其应用， 所 述TCR具有特异结合来源于HCA587/MAGEC2蛋白 的抗原肽 VIWEVLNAV ‑HLA*0201复合物的特性， 所 述TCR包含α链的可变区和恒定区及β链的可变 区和恒定区。 经过所述TCR修饰的T细胞能特异识 别癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2并被其激活， 对 HCA587/MAGEC2阳性且表达HLA ‑A*0201的肿瘤细 胞具有特异性杀伤作用， 可作为TCR ‑T细胞制剂 使用， 用于肿瘤患者的治疗或与其他药物联合治 疗。 权利要求书1页 说明书4页 序列表3页 附图2页 CN 114249811 A 2022.03.29 CN 114249811 A 1.一种针对癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2基因的特异性T细胞受体(TCR)， 其特征在于， 能够和HCA587/MAGEC2衍生的抗原肽VIWEVLNAV与HLA ‑A*0201形成的复合物发生特异性结 合。 2.根据权利要求1所述的识别癌 /睾丸抗原HCA587/MAGEC2的特异性T细 胞受体， 其特征 在于， 包含TCR的α 链和β 链， 所述的TCRβ 链的CDR3区的氨基酸序列与SEQ  ID NO： 02所示的序 列具有至少75％及以上同源性且功能相同的氨基酸序列； 或者所述TCRβ 链的CDR3区的序列 为SEQ ID NO： 02所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求2所述的特异识别HCA587/MAGEC2的T细胞受体， 其特征在于， 所述的 TCRβ 链可变区序列包 含CDR3区序列， 所述可变区氨基酸序列为SEQ  ID NO： 06所示的序列。 4.根据权利要求1或2 或3所述的特异识别癌 /睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T细胞受体， 其 特征在于， 所述TCRα 链的CDR3区的氨基酸序列与SEQ  ID NO： 04所示的序列具有至少75％及 以上同源性且功能相同的氨基酸序列； 或者所述TCRα 链的CDR3区的序列为SEQ  ID NO： 04所 示的氨基酸序列。 5.根据权利要求书4所述的特异识别癌 /睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T细 胞受体， 其特征 在于， 所述的TCRα链可变 区序列包含CDR3 区， 所述可变 区的序列为SEQ  ID NO： 08所示的氨 基酸序列。 6.根据权利要求书1或2或3或4或5所述的特异识别癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T细 胞受体， 其特 征为由TCRα 链和β 链形成的异源二聚体结构。 7.一种载体， 其特征为所述载体包含具有编码所述的特异识别癌/睾丸抗原HCA587/ MAGEC2的T细胞受体的核酸序列或所述氨基酸序列对应的优化密码子的核酸序列。 8.权利要求7所述载体， 为慢病毒载体， 包含特异识别癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T 细胞受体序列。 9.一种细胞， 特征为所述细胞的细胞膜上表达所述的特异识别癌/睾丸抗原HCA587/ MAGEC2的T细胞受体。 10.一种特异识别癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T细胞受体的应用， 其特征为用于制备 能够杀伤 表达HLA‑A*0201分子且癌/ 睾丸抗原H CA587/MAGEC2表达阳性的肿瘤 细胞。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114249811 A 2一种特异识别癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2的T细胞受体及其 应用 技术领域 [0001]本发明属于基因工程与肿瘤免疫治疗领域， 具体涉及一种特异识别癌/睾丸抗原 HCA587/MAGEC2的T细胞受体及其应用。 背景技术 [0002]肿瘤免疫治疗是通过调动患者机体的免疫系统对抗肿瘤细胞， 如何恢复和提高肿 瘤患者体内免疫细胞和免疫分子对肿瘤细胞的杀伤能力是肿瘤免疫治疗的关键。 目前肿瘤 治疗除采用传统的手术治疗结合放疗和化疗及 靶向治疗外， 免疫治疗作为新兴的治疗手段 显著提高了肿瘤患者的治疗效果。 T细胞抗原受体修饰的T细胞(TCR ‑T)是最具治疗前景的 免疫治疗手段之一， TCR ‑T细胞在患者体内可直接杀伤肿瘤细胞， 可以避免肿瘤 疫苗发挥作 用的延迟效应， 在临床试验中已经显示了良好的抗肿瘤作用。 [0003]T细胞利用其表面受体(TCR)特异识别抗原提呈细胞提呈的主要组织相容性复合 物(MHC)与抗原肽的复合物， 识别后发生活化、 扩增， 最后 分化形成效应性T细胞发挥作用。 TCR属于免疫球蛋白超家族中的一员， 由α 链和β 链组成， 两条链形成异源二聚体结构。 α 链和 β 链均由可变区和恒定区组成， 可变区是TCR特异识别抗原的区域， 可变区内有三个高变区 (又称为互补决定区， 即CDR区)， 其中CDR3区的氨基酸序列组成较CDR1和CDR2区显示了更大 的变异性， 因此CDR3区是决定TCR特异结合 抗原的关键区域。 [0004]T细胞是机体内发挥抗肿瘤免疫的主要细胞群体， 主要分为CD4+和CD8+T细胞。 CD4 +T细胞主要识别由抗原 提呈细胞提呈的与MHC  II类分子结合的抗原肽， 传统观 点认为这类 细胞主要通过分泌细胞因子发挥作用， 但目前研究认为一部分CD4+T细胞也可以直接发挥 杀伤作用； CD8+T细胞主要识别由抗原提呈细胞提呈的与MHC  I类分子结合的抗原肽， 主要 通过细胞毒作用杀伤肿瘤 细胞。 [0005]癌/睾丸抗原HCA587/MAGEC2在正常组织中仅分布于睾丸， 但在多种类型肿瘤中广 泛分布， 且在肿瘤的发生 发展中发挥重要作用， 抑制肿瘤细胞发生凋亡， 促进肿瘤细胞的周 期进程， 并促进肿瘤细胞的体内转移， 这些特点使其能够参与肿瘤恶性特征的维持。 因此， 癌/睾丸抗原H CA587/MAGEC2是肿瘤免疫 治疗理想的靶点。 [0006]T细胞受体改造的T细胞(TCR ‑T)疗法是目前肿瘤免疫治疗的重要手段之一， 该疗 法通过基因工程手段改造患者自身的免疫细胞再回输到患者体内， 通过这种免疫治疗方法 可以增强患者机体的免疫细胞对肿瘤细胞的特异识别和杀伤能力。 与同类型的其他免疫治 疗方式， 如CAR ‑T(嵌合性抗原受体改造T细胞疗法)、 CAR ‑NK等相比较， TCR ‑T疗法在实体肿 瘤治疗方面具有更加明显的优势， 并且具有更广泛的应用空间。 但是目前 的临床治疗中有 效靶点较少， 从而限制了该疗法的应用范围。 发明内容 [0007]本发明的目的是针对上述要解决的问题， 提供一种能够特异识别癌/睾丸抗原说　明　书 1/4 页 3 CN 114249811 A 3