(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111637582.0 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 河南省人民医院 地址 450000 河南省郑州市金 水区纬五路7 号 (72)发明人 徐登飞　仓顺东　陈文超　胡金龙　 任子瑞　孙培春　李德宇　李祥　 冯浩　 (74)专利代理 机构 郑州翊博专利代理事务所 (普通合伙) 41155 代理人 周玉青 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 31/713(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) C12N 15/113(2010.01) (54)发明名称 一种用于胃癌辅助诊断的标志 物及试剂盒 (57)摘要 本发明属于医药生物 技术领域， 公开了一种 用于胃癌辅助诊断的分子标志物——LncRNA   PAX8‑AS1。 LncRNA  PAX8‑AS1在胃癌的癌组织中 高表达， 在癌旁正 常组织中低表达； 而且， LncRNA   PAX8‑AS1在胃癌细胞系中的表达水平显著高于 正常胃黏膜细胞株； 通过敲低LncRNA  PAX8‑AS1 基因的表达水平， 能明显抑制胃癌细胞的增殖、 迁移和侵袭。 因此， LncRNA  PAX8‑AS1可以作为胃 癌辅助诊断的分子标志物； 通过检测样本中 LncRNA PAX8‑AS1的表达水平， 可以对胃癌进行 辅助诊断， 为临床医生对胃癌的诊断提供参考依 据。 权利要求书1页 说明书11页 序列表2页 附图4页 CN 114164278 A 2022.03.11 CN 114164278 A 1. LncRNA PAX8‑AS1的检测试剂在制备用于胃癌辅助诊断的产品中的应用。 2. 根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述产品通过实时定量PCR、 原位杂交、 Northern blotting、 芯片或高通 量测序平台检测样本中L ncRNA PAX8‑AS1的表达水平。 3. 根据权利要求1所述的应用， 其特征在于， 所述产品中含有扩增LncRNA  PAX8‑AS1的 特异性引物或与L ncRNA PAX8‑AS1杂交的探针。 4. 根据权利要求3所述的应用， 其特征在于， 扩增LncRNA  PAX8‑AS1的特异性引物的核 苷酸序列如SEQ  ID NO.1和SEQ  ID NO.2所示。 5.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述样本包括组织、 细胞、 体液； 所述产品 为芯片、 制剂或试剂盒。 6. 抑制LncRNA  PAX8‑AS1表达和/或功能的物质在制备用 于治疗胃癌的产品中的应 用。 7. 抑制LncRNA PAX8‑AS1表达和/或功能的物质在 如下任一中的应用： （a1） 制备用于抑制肿瘤生长的产品， 或抑制肿瘤生长中的应用； 所述肿瘤为胃癌； （a2） 制备用于抑制胃癌细胞增殖的产品， 或抑制胃癌细胞增殖； （a3） 制备用于抑制胃癌细胞侵 袭的产品， 或抑制胃癌细胞侵 袭； （a4） 制备用于抑制胃癌细胞迁移的产品， 或抑制胃癌细胞迁移。 8. 根据权利要求6或7所述的应用， 其特征在于， 所述抑制LncRNA  PAX8‑AS1表达和/或 功能的物质包括特异靶向L ncRNA PAX8‑AS1的siRNA。 9. 根据权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述特异靶向LncRNA  PAX8‑AS1基因的 siRNA包括siRNA  1和siRNA  2， siRNA 1和siRNA  2均由正义链和反义链 组成； siRNA  1正义 链的序列如SEQ  ID NO.3所示， siRNA  1反义链的序列如SEQ  ID NO.4所示； siRNA  2正义链 的序列如SEQ  ID NO.5所示， siRNA  2反义链的序列如SEQ  ID NO.6所示。 10. 一种治疗胃癌 的药物， 其特征在于， 所述药物中含有抑制LncRNA  PAX8‑AS1表达 和/或功能的物质； 所述抑制LncRNA  PAX8‑AS1表达和/或功能的物质包括特异靶向LncRNA   PAX8‑AS1的siRNA。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114164278 A 2一种用于胃癌辅助诊断的标志物及 试剂盒 技术领域 [0001]本发明属于医药生物技术领域， 具体涉及 一种用于胃癌辅助诊断的标志物及试剂 盒。 背景技术 [0002]胃癌是危及世界尤其是我国国民的最常见的消化道恶性肿瘤， 近年来其发病率及 死亡率不断升高。 根据最新全球癌症数据显示， 中国年癌症新发病例已达457万， 其中胃癌 约有48万， 占10.8％， 死亡例数约37万， 占12.4％， 发病率及死亡率位均位列前三。 因此， 揭 示胃癌发生发展的分子机制对胃癌的早期诊断及探寻有效的治疗靶点具有重大的科学意 义及临床意 义。 [0003]近年来关于长链非编 码RNA(long  non‑coding RNA,lncRNA)在肿瘤中的功能越来 越受到重视， 长链非编码RNA是一类 真核生物中长度大于200nt的非编码RNA分子。 根据其与 邻近基因的位置 可以分为反义lncRNA、 增强子lncRNA、 基因间lncRNA、 双向lncRNA和内含子 lncRNA。 它具有多种 生物学功能， 比如在细胞核中作为分子支架、 协助可变剪接、 调节染色 体结构， 或在细胞质中调控翻译、 促进或抑制mRNA降解等。 这些功能显示lncRNA可能与肿瘤 的发生、 发展密切相关， 可以作为 新的肿瘤标记 物及特异性的治疗 靶点。 [0004]PAX8‑AS1是一种反义lncRNA， 位于2号染色体q14.1。 近年来有研 究表明PAX8‑AS1 在甲状腺癌发挥抑癌基因作用， PAX8 ‑AS1亚型PAX8 ‑AS1‑N在乳腺癌中抑制肿瘤的生长， 且 与骨质疏松 症、 糖尿病肾病等疾病相关， 但PAX8 ‑AS1在胃癌中的作用及机制未有报道。 发明内容 [0005]本发明的目的之一旨在提供一种用于胃癌辅助诊断的分子标志物——LncRNA   PAX8‑AS1； 本发明的目的之二旨在提供一种LncRNA  PAX8‑AS1的检测试剂在制备用于胃癌 辅助诊断的产品中的应用； 本发明的目的之三旨在提供一种用于 胃癌辅助诊断的试剂盒； 本发明的目的之四旨在提供一种抑制LncRNA  PAX8‑AS1表达和/或功能的物质在制备治疗 胃癌的药物中的应用； 本发明的目的之五旨在提供一种治疗胃癌的药物。 [0006]为实现发明目的， 本发明采用的技 术方案如下： [0007]本发明第一方面提供了一种可用于胃癌辅助诊断的分子标志物， 所述分子标志物 为LncRNA PAX8‑AS1(NCBI基因ID： 6 54433)。 [0008]通过实时荧光定量PCR检测LncRNA  PAX8‑AS1在胃癌组织和癌旁正常组织中表达 情况， 发现LncRNA  PAX8‑AS1在胃癌的癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织； 说明 LncRNA PAX8‑AS1在胃癌组织中均有不同程度的表达上调。 [0009]通过实时荧光定量P CR检测LncRNA  PAX8‑AS1在胃癌细胞系SNU ‑16、 MGC‑803、 MKN‑ 7、 MKN‑45、 MKN‑28以及正常 胃黏膜上皮细胞株GSE ‑1中的表达情况， 发现LncRNA  PAX8‑AS1 在胃癌细胞系中的表达水平显著高于正常胃黏膜细胞株； 说明LncRNA  PAX8‑AS1在胃癌细 胞系中均有不同程度的表达上调。说　明　书 1/11 页 3 CN 114164278 A 3