(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111594526.3 (22)申请日 2021.12.23 (71)申请人 江苏医药职业学院 地址 224008 江苏省盐城市解 放南路283号 (72)发明人 李梦琳　梅峰　胡明　张虎　 (74)专利代理 机构 北京思创大成知识产权代理 有限公司 1 1614 代理人 高爽 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) G01N 33/574(2006.01) A61K 45/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因 LPR8检测试剂盒及应用 (57)摘要 本发明属于生物 技术领域， 涉及一种肾透明 细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及 应用。 本发明研究证实肾透明细胞癌中LPR8表达 显著下降。 LPR8表达水平与免疫微环境指标 StromalSc ore， Immun eScore和ESTIMAT EScore均 呈正相关， 与多种免疫细胞浸润正相关， 且与免 疫检查点基因表达正相关， 由此说明， LPR8可以 作为肾透明细胞癌免疫 治疗新靶点。 权利要求书1页 说明书5页 序列表1页 附图3页 CN 114410777 A 2022.04.29 CN 114410777 A 1.检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制 剂 中的应用。 2.根据权利 要求1所述的应用， 其 中， 所述检测LPR8表达水平包括检测LPR8的mRNA表达 水平和/或检测LPR8的蛋白表达水平。 3.根据权利 要求1所述的应用， 其 中， 所述检测LPR8表达水平的方法包括： 通过RT ‑qPCR 方法检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8  mRNA的表达量； 通过分子探针技术检测肾透明 细胞癌和癌旁组织中LPR8  mRNA表达量； 通过免疫组化或Western ‑Blot检测肾透明细胞癌 和癌旁组织中LPR8蛋白表达量。 4.根据权利 要求1所述的应用， 其 中， 所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8  DNA序 列或mRNA序列的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向LPR8的抗体。 5.根据权利要求4所述的应用， 其中， 所述检测LPR8表达水平的试剂为SEQ  ID NO： 1和 SEQ ID NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 6.一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒， 该试剂盒包括： 检测LPR8 表达水平的试剂。 7.根据权利 要求6所述的试剂盒， 其 中， 所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8  DNA 序列或mRNA序列的寡核酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向LPR8的抗体。 8.根据权利要求7所述的试剂盒， 其中， 所述检测LPR8表达水平的试剂为具有SEQ  ID  NO： 1和SEQ  ID NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 9.根据权利要求6所述的试剂盒， 其中， 所述试剂盒还包括以下组分中的至少一种： Trizol、 异丙醇、 氯仿、 无水乙醇、 无RNA酶水、 随机引物、 5 ×M‑MLV缓冲液、 dNTPs、 RNA酶抑制 剂、 M‑MLV逆转录酶、 具有SEQ  ID NO： 3和SEQ  ID NO： 4所示核苷酸序列的A CTB实时荧光定量 PCR特异性引物。 10.权利要求6 ‑9中任意一项所述的试剂 盒在制备用于肾透 明细胞癌检测和/或辅助免 疫治疗的制剂中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114410777 A 2一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LP R8检测试剂盒及 应用 技术领域 [0001]本发明属于生物技术领域， 具体地， 涉及一种检测LPR8表达水平的试剂在制备用 于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂 中的应用， 以及一种肾透明细胞癌辅助免 疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用。 背景技术 [0002]肾透明细胞癌(Ki dney renal clear cell carcino， KIRC)是肾肿瘤中最常见且 预后相对较差的一种类型。 随着时代发展和当代高通量测序技术的进步， 人们在分子层面 上对肾透明细胞癌有了更深入的理解， 然而目前其发生、 进展及转移机制仍不清楚， 并且缺 乏有效的生物标志物。 近几十年来， 越来越多的研究表明， 肿瘤细胞与微环境之 间的相互作 用对治疗和预后有重要影响。 免疫治疗是一种 具有前景 的肾透明细胞癌治疗新方式， 存在 治疗响应率不高、 副作用等问题， 开发新型辅助免疫治疗新靶点对于临床肿瘤 免疫治疗具 有重要意 义。 发明内容 [0003]本发明的目的是提供一种肾透明细胞癌免疫治疗新靶点LPR8， 并由此提供一种检 测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌检测和/或辅助免疫治疗的制剂中的应 用， 以及一种肾透明细胞癌辅助免疫 治疗靶基因LPR8检测试剂盒及应用。 [0004]本发明的第一方面提供一种检测LPR8表达水平的试剂在制备用于肾透明细胞癌 检测和/或辅助免疫 治疗的制剂中的应用。 [0005]进一步地， 所述检测LPR8表达水平包括检测LPR8的mRNA表达水平和/或检测LPR8 的蛋白表达水平。 [0006]进一步地， 所述检测LPR8表达水平的方法包括： 通过RT ‑qPCR方法检测肾透明细胞 癌和癌旁组织中LPR8  mRNA的表达量； 通过分子探针技术检测肾透明细胞癌和癌旁组织中 LPR8 mRNA表达量； 通过免疫组化或Western ‑Blot检测肾透明细胞癌和癌旁组织中LPR8蛋 白表达量。 [0007]更具体地， 所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8  DNA序列或mRNA序列的寡核 酸探针、 PCR引物， 或者 为靶向LPR8的抗体。 [0008]根据本发明， 优选地， 所述检测LPR8表达水平的试剂为S EQ ID NO： 1和SEQ  ID NO： 2所示核苷酸序列的实时荧 光定量PCR特异性引物。 [0009]5’ ‑CTTGCTGTGCATG GGAGGAT‑3’(SEQ ID NO： 1) [0010]5’ ‑AGTCCGCCCAATGTGGATTT‑3’(SEQ ID NO： 2) [0011]本发明的第二方面提供一种肾透明细胞癌辅助免疫治疗靶基因LPR8检测试剂盒， 该试剂盒包括： 检测LPR8表达水平的试剂。 [0012]进一步地， 所述检测LPR8表达水平的试剂为靶向LPR8  DNA序列或mRNA序列的寡核说　明　书 1/5 页 3 CN 114410777 A 3