(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111643871.1 (22)申请日 2021.12.3 0 (71)申请人 山东源科生物科技股份有限公司 地址 277020 山东省枣庄市高新区复元三 路3168号 (72)发明人 孙波　 (74)专利代理 机构 济南格源知识产权代理有限 公司 373 06 代理人 张蕾 (51)Int.Cl. A61K 38/47(2006.01) A61K 9/127(2006.01) A61P 1/00(2006.01) A61P 31/04(2006.01) A61P 1/10(2006.01)A61P 1/12(2006.01) A61P 39/06(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 7/02(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 3/04(2006.01) A61P 27/02(2006.01) A61K 35/747(2015.01) A61K 31/7048(2006.01) A61K 31/702(2006.01) (54)发明名称 一种脂质体包裹乳 糖酶的生产工艺 (57)摘要 本发明属于乳糖酶技术领域， 尤其涉及一种 脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 包括以下工艺步 骤： 将膜材溶于有机溶剂中， 经减压蒸发去除有 机溶剂， 形成脂质薄膜； 将乳糖酶溶解在溶剂中 得到乳糖酶溶液； 向脂质薄膜中加入乳糖酶溶 液， 溶解脂质薄膜， 冰浴超声， 得到脂质体 ‑乳糖 酶溶液； 用微孔滤膜过滤， 得到包裹乳糖酶的脂 质体。 本发明利用脂质体包裹乳糖酶， 将乳糖酶 与外界环境隔开， 保护其不受环境条件影响， 防 止其氧化变质， 延长其活性时间， 增加了乳糖酶 的稳定性， 且脂质体可通过胞吞或膜融合等方式 将蛋白酶转入细胞内， 能有效解决其作为生物大 分子难以透过细胞膜的难题， 可大大提高其作用 效果和利用率。 权利要求书1页 说明书6页 CN 114209817 A 2022.03.22 CN 114209817 A 1.一种脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特 征在于， 包括以下工艺 步骤： （1） 将膜材 溶于有机溶剂中， 经减压蒸发去除有机溶剂， 形成脂质薄膜； （2） 将乳糖酶溶解在溶剂中得到 乳糖酶溶 液； （3） 向脂质 薄膜中加入乳糖酶溶液， 溶解脂质 薄膜， 冰浴超声， 得到脂质体 ‑乳糖酶溶 液； （4） 用微 孔滤膜过 滤， 得到包裹乳糖酶的脂质体。 2.根据权利要求1所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述 膜材包括胆固醇和卵磷脂， 所述胆固醇和卵磷脂的重量比为1∶2 ～1∶ 6。 3.根据权利要求1所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述 的有机溶剂中膜材浓度为3.0～6mg/mL； 所述减压蒸发的温度为5 0～70℃。 4.根据权利要求3所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （1） 中， 所述 有机溶剂包括无 水乙醇、 无 水乙醚、 乙醇和氯仿中的一种或多种的组合。 5.根据权利要求1所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （2） 中， 所述 溶剂为磷酸盐缓冲溶 液， PH值为6.0～7.0 。 6.根据权利要求5所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （2） 中， 所述 蛋白酶溶 液中蛋白酶的浓度为0.5～1.5mg/ml。 7.根据权利要求1所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （4） 中， 所述 脂质体的直径为5 0～200nm。 8.根据权利要求1所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 步骤 （4） 中， 得到 包裹乳糖酶的脂质体后， 再用复合益生菌溶液进行包覆， 得到复合益生菌包覆的蛋白酶脂 质体。 9.根据权利要求8所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 在复合益生菌包 覆的乳糖酶脂质体外再进行脂质体包覆， 最终得到脂质体 ‑复合益生菌 ‑脂质体‑乳糖酶的 四层包覆结构的脂质体。 10.根据权利要求9所述的脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 其特征在于， 所述复合益生 菌溶液中包括以下重量份的组分： 副干酪乳杆菌菌粉 （单位质量菌落数为6.0 ×1010cfu/g） 5‑15份、 嗜酸乳杆菌菌粉 （单位质量菌落数为5 ×1010cfu/g） 8‑20份、 葡萄皮花色苷1 ‑3份、 低 聚果糖5‑20份。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114209817 A 2一种脂质体包裹乳糖酶的生产工艺 技术领域 [0001]本发明属于 乳糖酶技 术领域， 尤其涉及一种脂质体包裹乳糖酶的生产工艺。 背景技术 [0002]乳糖酶， 别名 β ‑半乳糖苷酶， 乳糖酶能催化β ‑D‑半乳糖苷和α ‑L‑阿拉伯糖苷 水解。 乳糖酶可将人体内过多的乳糖分解成葡萄糖和半乳糖。 葡萄糖是人体各部 分代谢的能量来 源， 半乳糖则是人大脑和黏膜组织代谢时必需的结构 糖， 是婴幼儿脑发育的必 要组织， 与婴 儿大脑的迅速成长有密切联系。 再者， 乳糖酶还可在人体内通过转糖苷作用生成低聚糖， 这 些低聚糖是一种低分子量， 不粘稠的水溶性膳食纤维#它在肠道内作为增殖因子仅被双歧 杆菌利用#却不会被腐败细菌利用， 如此可大大减少肠道有害毒 素的产生， 对预防便秘和腹 泻有很重要的作用。 乳糖酶主要用于乳品工业， 可使低甜度和低溶解度的乳糖转变为较甜 的、 溶解度较大的单糖(葡萄糖和半乳糖)； 使冰淇淋、 浓缩乳、 淡炼乳中乳糖结晶析出的可 能性降低， 同时增加甜度； 在发酵和焙烤工业中， 可使不能被一般酵母利用的乳糖因水解成 葡萄糖而得以利用。 [0003]由于乳糖酶对环境条件敏感， 容易氧化变质， 造成应用上的缺陷。 脂质体是由磷脂 双分子层形成的内部包含水相的封闭囊泡， 具有缓释性、 细胞亲和性、 组织相容性等优点， 已成功应用于医药、 化工、 化妆品等领域中。 因此， 研究出一种脂质体包裹乳糖酶的生产工 艺， 以提高乳糖酶的稳定性和生物利用性， 是本领域 技术人员亟 待解决的技 术问题。 发明内容 [0004]为解决上述现有技术中存在的问题， 本发明提供了一种脂质体包裹乳糖酶的生产 工艺。 [0005]为实现上述目的， 本发明采用如下技 术方案： 一种脂质体包裹乳糖酶的生产工艺， 包括以下工艺 步骤： （1） 将膜材 溶于有机溶剂中， 经减压蒸发去除有机溶剂， 形成脂质薄膜； （2） 将乳糖酶溶解在溶剂中得到 乳糖酶溶 液； （3） 向脂质薄膜中加入乳糖酶溶液， 溶解脂质薄膜， 冰浴超声， 得到脂质体 ‑乳糖酶 溶液； （4） 用微 孔滤膜过 滤， 得到包裹乳糖酶的脂质体。 [0006]优选的， 步骤 （1） 中， 所述膜材包括胆固醇和卵磷脂， 所述胆固醇和卵磷脂的重量 比为1∶2～1∶ 6。 [0007]优选的， 步骤 （1） 中， 所述的有机溶剂中膜 材浓度为3.0～6m g/mL； 所述减压蒸发的 温度为50～70℃。 [0008]优选的， 步骤 （1） 中， 所述有机溶剂包括无水乙醇、 无水乙醚、 乙醇和氯仿中的一种 或多种的组合。 [0009]优选的， 步骤 （2） 中， 所述溶剂为磷酸盐缓冲溶 液， PH值为6.0～7.0 。说　明　书 1/6 页 3 CN 114209817 A 3