(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202111638621.9 (22)申请日 2021.12.2 9 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114259476 A (43)申请公布日 2022.04.01 (73)专利权人 中南大学湘雅三医院 地址 410000 湖南省长 沙市岳麓区桐梓坡 路 (72)发明人 王胜峰　杨明华　周文虎　 (74)专利代理 机构 长沙伊柏专利代理事务所 (普通合伙) 4326 5 专利代理师 周正雄 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 47/30(2006.01)A61K 31/519(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) 审查员 姚张欢 (54)发明名称 一种调控巨噬细胞的纳米制剂及其制备方 法与应用 (57)摘要 本发明提供了一种调控巨噬细胞的纳米制 剂及其制备方法与应用， 该纳米制剂包括纯药物 IPI549纳米内核、 核酸药物CpG和金属有机框架 MOF， 所述IPI549自组装形成纳米内核， 鞣酸和铁 配位作用形成金属有机框架包裹IPI549纳米内 核， 并包载核酸药物CpG形成多功能纳米制剂 IPI549@MOF/CpG。 本发明的纳米制剂， 通过金属 有机框架将亲水性IPI549和疏水性CpG实现共载 并发挥协同作用， 促进巨噬细胞复极化为M1型， 然后通过CpG刺激M1型巨噬细胞增加摄取吞噬肿 瘤细胞并且分泌细胞因子来实现抗肿瘤活性； 另 一方面， IPI549可以提高摄取肿瘤细胞后的巨噬 细胞抗原提呈能力， 来激发强有力的适应性免 疫， 该纳米制剂可与PD ‑L1抗体协同作用引发强 大的抗肿瘤免疫反应， 为肿瘤免疫治疗提供新思 路。 权利要求书1页 说明书10页 附图7页 CN 114259476 B 2022.09.02 CN 114259476 B 1.一种调控巨噬细胞的纳米制剂， 其特征在于， 所述纳米制剂包括纯药物IPI549纳米 内核、 核酸药物CpG和金属有机框架MOF， 所述IPI549自组装 形成纳米内核， 所述金属有机框 架包裹IPI549纳米内核并包载核酸药物CpG形成纳米制剂IPI549@MOF/CpG， 所述金属有机 框架由鞣酸和铁配位作用形成， 所述金属有机框架M OF、 纯药物IPI549纳米内核和核酸药物 CpG的质量比为3 0:5～30:1～5， 所述纳米制剂为核壳结构， 平均粒径为15 0～300nm； 所述调控巨噬细胞的纳米制剂的制备 方法， 包括以下步骤： S1、 在震荡超声条件下， 将IPI549溶解于二甲基亚砜， 随后加入大量的超纯水中， IPI549迅速成核生长， 自组装形成纯 药物IPI549纳米内核； S2、 在步骤S 1中制得的IPI549纳米 内核中加入鞣酸和FeCl3水溶液， 超声2～10min后充 分涡旋， 鞣酸与Fe3+在IPI549纳米内核表面配位形成金属有机框架MOF， 将IPI549纳米内核 包裹， 形成IPI549@MOF纳米粒； S3、 在步骤S2制得的IPI549@MOF纳米粒中加入CpG水溶液， 室温下孵育30～60min， 高速 离心后弃去上清， 取沉淀加入 超纯水复溶， 得到IPI549@MOF/ CpG纳米粒。 2.根据权利要求1所述的调控巨噬细胞的纳米制 剂， 其特征在于， 所述步骤S1中二甲基 亚砜与超纯 水的体积比为1： 10～5 00。 3.根据权利要求1所述的调控巨噬细胞的纳米制 剂， 其特征在于， 所述步骤S2中鞣酸与 FeCl3的质量比为1～10： 1。 4.一种如权利要求1 ‑3任一项所述的调控巨噬细胞的纳米制剂在制备抑制肿瘤生长药 物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114259476 B 2一种调控巨噬细胞的纳米制剂及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明涉及纳 米材料和纳米生物医药领域， 具体涉及一种调控巨噬细胞的纳 米制 剂及其制备 方法与应用。 背景技术 [0002]免疫疗法是当今国际公认最有前景的肿瘤治愈手段之一， 激活机体的免疫系统以 攻击肿瘤细胞， 相关 免疫治疗药物也大量上市。 但是目前临床统计数据显示， 免疫治疗的疗 效不尽如人意， 不到30％的患者可以获益， 其原因与肿 瘤免疫抑制微环境(ITM)有关。 肿 瘤 的免疫应答是一个连续的多环节过程， 包括肿瘤抗原的释放、 抗原提呈、 效应T细胞的浸润 以及T细胞对肿瘤细胞的攻击。 以上过程属于串联过程， 任意环节束缚都会影响肿瘤免疫的 效应。 然而， 目前已上市的免疫治疗药物大多仅关注T细胞对肿瘤细胞的攻击， 忽略了前面 多个环节而导致治疗失败。 实际上， T细胞攻击肿瘤细胞之前的多个免疫环节均由抗原 提呈 细胞(APC)完成， 其主要职责是摄取并加工肿 瘤抗原， 将抗原提呈至T细胞以激活抗肿瘤效 应。 同时， APC还分泌多种细胞因子对肿 瘤细胞直接杀伤， 以及招募与激活T细胞。 因此， APC 是需要重点关注的免疫 治疗靶标， 也是提升免疫 治疗疗效的重要前提。 [0003]巨噬细胞是肿瘤组织中含量最为丰富的APC， 约占细胞总量的50％， 在不同的刺激 下可以分化成截然不同的表型： M1型或M2型。 在肿瘤发生初期， 巨噬细胞倾向于极化为M1 型， 发挥抗肿瘤作用。 随着肿 瘤的进展， ITM促进巨噬细胞极化为M2型的肿瘤相关巨噬细胞 (TAM)， 协助肿瘤生长、 侵袭与转移。 因此， 巨噬细胞的 “沉默”和“叛变”引起抗肿瘤免疫级 联 反应的断裂， 是导致免疫治疗失败的主因之一。 极化的巨噬细胞是可塑的， 在不同的处理方 式下可以进行表型转换， 如M2型巨噬细胞可以在某些刺激下逆转为M1型， 以恢复其抗肿瘤 活性。 为此， 人们开发了多种巨噬细胞靶向策略来调控， 如巨噬细胞的消耗和抑制、 巨噬细 胞的再极化， 以及增强其吞噬作用等。 虽然抑制/消耗TAM s的策略已经产生了实际的临床 影 响， 但重编辑巨噬细胞更具吸引力， 因为可以以最小的副作用调节ITM， 并协同免疫检查点 阻断(ICB)来增强免疫治疗效果。 尽管已有多种靶向TAM的智能纳米制剂， 但目前仍需进一 步开发一类简单 的纳米制剂协同增强TAM的天然免疫与适应性免疫反应， 从而高效启动肿 瘤免疫应答， 抑制肿瘤侵 袭和迁移。 发明内容 [0004]为解决上述技术问题， 本发明提出了一种调控巨噬细胞的纳米制剂及 其制备方法 与应用， 其目的是构建一种纳米制剂， 通过共 载IPI549和CpG发挥协同作用以促进巨噬细胞 复极化为M1型， 然后通过CpG刺激M1型巨噬细胞增加 摄取吞噬肿瘤细胞并且分泌细胞因子 来实现抗肿瘤活性； 另一方面， IPI549可以提高摄取肿瘤细胞后的巨噬细胞抗原 提呈能力， 来激发强有力的适应性免疫， 协同作用引发强大 的抗肿瘤 免疫反应， 为肿瘤 免疫治疗提供 新思路。 [0005]为了实现上述目的， 本发明首先提供了一种调控巨噬细胞的纳米制剂， 所述纳米说　明　书 1/10 页 3 CN 114259476 B 3