(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111634156.1 (22)申请日 2021.12.2 9 (71)申请人 源道隆 （苏州） 医学 科技有限公司 地址 215000 江苏省苏州市相城区苏州工 业园区星湖街218号生物纳米园B2楼 513室 (72)发明人 徐士杰　吴稚伟　吴喜林　 (74)专利代理 机构 武汉大楚知识产权代理事务 所(普通合伙) 42257 代理人 徐杨松　杨旭瑞 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01)A61K 39/00(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 可结合BCMA的纳米抗体及其应用 (57)摘要 本发明涉及一种抗BCMA纳米抗体， 包括3个 互补决定区CDR1 ‑3， 序列分别如SEQ  ID NO:1‑3 所示本发明针对B细胞淋巴瘤 进行纳米抗体药物 开发， 通过制备人BCMA蛋白、 免疫羊驼、 利用噬菌 体库展示纳米单抗的平台技术等， 筛选到特异性 结合BCMA的纳米抗体VHH， 鉴定了其CDR序列， 并 构建了人源化的纳米抗体； 同时利用流式细胞术 鉴定其结合B细胞淋巴瘤细胞的能力。 本发明为B 细胞淋巴瘤的临床治疗提供潜在的纳米抗体新 药,同时为B细胞淋巴瘤患者的诊断提供相应的 检测试剂。 权利要求书1页 说明书5页 序列表2页 附图2页 CN 114276452 A 2022.04.05 CN 114276452 A 1.一种可结合BCMA的纳米抗体， 其特征在于， 包括3个互补决定区CDR1 ‑3序列分别如 SEQ ID NO:1‑3所示。 2.根据权利要求1所述的纳米抗体， 其特征在于， 所述纳米抗体还包括4个框架区FR1 ‑ 4， 所述FR 1‑4与所述CDR 1‑3按顺序交错 排列。 3.根据权利要求1所述的纳米抗体， 其特征在于， 所述纳米抗体为羊驼源的VHH或人源 化的VHH。 4.权利要求1 ‑3中任一项所述的纳米抗体在制备BC MA检测剂中的应用。 5.权利要求1 ‑3中任一项所述的纳米抗体在制备B 细胞淋巴瘤治疗药物中的应用。 6.权利要求1‑3中任一项所述的纳米抗体在制备针对B细胞淋巴瘤的CAR  T细胞治疗剂 中的应用。 7.一种核酸， 其特 征在于， 编码权利要求1 ‑3中任一项所述的多肽。 8.权利要求7 所述的核酸在制备基因治疗药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114276452 A 2可结合BCMA的纳米抗体及其应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药领域。 更特别地， 涉及一种可结合B CMA的纳米抗体， 以及所述 纳米抗体在制备BC MA检测剂或B 细胞淋巴瘤治疗药物中的应用。 背景技术 [0002]BCMA是B细胞成熟抗原， 是一种跨膜糖蛋白， 亦称CD269或TNFRSF17， 是TNF受体超 家族成员之一， 它的配体是B细胞激活因子(BAFF)以及增殖诱导配体(APRIL)。 BCMA的表达 限于B细胞谱系， 主要存在于浆细胞和浆母细胞上， 研究表明， BCMA  mRNA和蛋白在 恶性浆细 胞上的表达远高于正常浆细胞， 而在初始B细胞和记忆B细胞及其他正常组织细胞上不表 达。 BAFFF及APRIL通过BCMA的信号传导促进恶性浆细胞的存活。 此外， 有研究表明， 在供体 淋巴细胞输注与 移植物抗肿瘤反应后缓解的多发性骨髓瘤患者中检测到BCMA 抗体， 以上研 究结果表明， BC MA是非常有前 景的B细胞淋巴瘤的靶向疗法抗原。 [0003]1993年， 一种来源于骆驼科的新型天然抗体被发现。 该抗体天然缺失轻链而只由 重链组成， 其重链包含两个恒定区(CH2和CH3)、 一个铰链区和一个重链可变区(Variable   heavy chain domain， V HH， 即抗原结合位点)， 该重链可变区的相对分子质量约为13 KDa， 仅 为常规抗体的1/10， 且分子高度和直径均在纳米级别， 是目前可获得的最小的功能性抗体 片段， 因此又被称为纳米单抗(Nanobody， Nb)。 因纳米单抗稳定性高(90℃条件下仍不会降 解)、 亲和力高、 与人源抗体同源性超过8 0％、 毒性和免疫原 性均较低等特点， 最近纳米单抗 被广泛用于免疫诊断试剂盒研发、 影像学研发以及针对肿瘤、 炎症、 传染病和神经系统疾病 等领域的抗体药物研发。 [0004]治疗性抗体药物发展的趋势从鼠源、 人鼠嵌合、 人源化再到全人源， 再到近年得到 广泛关注的纳米抗体， 纳米抗体的研发得到高速发展。 2018年9月首个纳米抗体药物获批。 目前国内外有多个纳米抗体药物在临床研究阶段。 我们期望通过免疫羊驼， 获得高亲和力 的靶向BC MA的治疗性纳米抗体。 发明内容 [0005]本发明通过用抗原免疫羊驼， 获取羊驼源纳米单抗及其VHH， 用于诊 断和治疗B细 胞淋巴瘤病人。 基于这些研究， 本发明提供了一种可结合BCMA的纳米抗体， 包括3个互补决 定区CDR1‑3序列分别如SEQ  ID NO:1‑3所示。 [0006]在一个具体实施方案中， 所述纳米还包括4个框架区FR1 ‑4， 所述FR1 ‑4与所述 CDR1‑3交错排列。 例如， 可将F R1‑4序列设计为如SEQ  ID NO:4‑7所示(羊驼源)， 但本发明的 范围不限于此。 抗体的特异性识别和结合能力主要由CDR区序列决定， FR序列影响不大， 可 根据物种来设计， 这是本领域公知的。 可设计人源、 鼠源或骆驼源的FR区序列来连接上述 CDR， 从而得到一个可 结合BCMA的纳米抗体。 [0007]本发明还提供了上述纳 米抗体在制备B CMA检测剂中的应用， 该抗体即可检测游离 的BCMA蛋白， 也可检测细胞表面的BC MA蛋白。说　明　书 1/5 页 3 CN 114276452 A 3