(19)中华 人民共和国 国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202111645503.0 (22)申请日 2021.12.3 0 (71)申请人 复旦大学 地址 200433 上海市杨 浦区邯郸路2 20号 (72)发明人 姜嫣嫣　刘云虎　杨月滢　 (74)专利代理 机构 上海科盛知识产权代理有限 公司 312 25 代理人 褚明伟 (51)Int.Cl. A61K 9/51(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61K 47/28(2006.01) A61P 3/10(2006.01) A61P 31/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01)B82Y 5/00(2011.01) B82Y 40/00(2011.01) (54)发明名称 基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒 系统及其制备方法和应用 (57)摘要 本发明涉及基于科罗索酸或其类似物的脂 质纳米颗 粒系统及其制备方法和应用。 本发明提 供的脂质纳米颗粒由包括科罗索酸或其类似物 和脂质材料制备而成， 科罗索酸类似物包括熊果 酸和齐墩果酸， 脂质材料由可电离的阳离子脂 质、 中性磷脂、 PEG化磷脂以及含有或不含胆固醇 组成， 科罗索酸或其类似物与脂质体材料的摩尔 比为1： 9～1： 1。 与现有技术相比， 本发明提供的 基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒具有 更强的细胞穿膜和组织渗透能力， 本脂质纳米颗 粒用于核酸 分子的递送载体， 包 载至少一种核酸 药物后， 可被细胞高效摄取， 并通过内体逃逸能 力， 达到显著提高核酸类药物的预防和治疗效 果。 权利要求书2页 说明书11页 附图2页 CN 114306279 A 2022.04.12 CN 114306279 A 1.一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒， 其特征在于， 为由科罗索酸或其类 似物和脂质材料制备而成的脂质纳米颗粒， 所述科罗索酸的类似物为熊果酸或齐墩果酸， 科罗索酸或其类似物与脂质体材 料的摩尔比为1： 9 ～1： 1。 2.根据权利要求1所述的一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒， 其特征在于， 所述脂质材料由可电离的阳离子脂质、 中性脂质、 PEG化脂质组成， 所述可电离的阳离子脂 质、 中性脂质、 PEG化脂质的摩尔比为(10～70)： (2 ～30)： (0.1～10)， 优选为5 0： 10： 0.1～5 。 3.根据权利要求2所述的一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒， 其特征在于， 所述可电离的阳离子脂质选自1,2 ‑双十八烯氧基 ‑3‑甲基铵丙烷(氯盐)、 (2,3 ‑二油酰基 ‑ 丙基)‑三甲基氯化铵、 双甲基双十八烷基溴化铵、 N ‑[1‑(2,3‑二油酰基)丙基] ‑N‑(精氨酸 基酰胺)乙基 ‑N,N‑二甲基三氟乙酸铵、 N,N ‑二羟乙基 ‑N‑甲基‑N‑2‑(胆固醇氧羰基氨基)乙 基溴化铵、 乙基磷脂酰胆碱、 3β ‑[N‑(N’,N’ ‑二甲基胺乙基)胺基甲酰基]胆固醇、 (2S) ‑2,5‑ 二(3‑氨基丙基氨基) ‑N‑[2‑(双十八烷基氨基)乙酰基]戊酰胺、 N1 ‑(2‑{(1S)‑1‑[(3‑氨基 丙基)氨基] ‑4‑[二(3‑氨基丙基)氨基]丁基甲酰胺基}乙基) ‑3,4‑二(油酰氧基) ‑苯甲酰 胺、 N4‑胆固醇‑精胺、 2,2 ‑二亚油基 ‑4‑二甲氨基乙基 ‑[1,3]‑二氧戊环、 4 ‑(N,N‑二甲基氨 基)丁酸(二亚油基)甲酯、 9 ‑(4‑(二甲氨基)丁酰氧基)十七烷二酸二((Z) ‑壬‑2‑烯‑1‑基) 酯、 8‑[(2‑羟乙基)(8 ‑壬氧基‑8‑氧代辛基)氨基]辛酸(十七烷 ‑9‑基)酯、 8‑[(2‑羟乙基) (6‑氧代‑6‑癸氧基己基)氨基]辛酸(十七烷 ‑9‑基)酯、 [(4 ‑羟基丁基)氮杂二基]双(己烷 ‑ 6,1‑二基)双(2 ‑己基癸酸酯)、 1,1' ‑[(2‑{4‑[2‑({2‑[双(2‑羟基十二烷基)氨 基]乙基}(2 ‑ 羟基十二烷基)氨基)乙基]哌嗪 ‑1‑基}乙基)氮杂 二烷基]双(十二烷 ‑2‑醇)、 四(8 ‑甲基壬 基)3,3',3 ”,3”'‑{[(甲基氮杂二烷基)双(丙烷 ‑3,1二基)]双(氮杂三基)}四丙酸酯、 3,6 ‑ 双{4‑[双(2‑羟基十二烷基)氨基]丁基 }哌嗪‑2,5‑二酮、 3,6 ‑双(4‑{双[(9Z,12Z) ‑2‑羟基 十八碳‑9,12‑二烯‑1‑基]氨基}丁基)哌嗪 ‑2,5‑二酮、 {[(3,6 ‑二氧代哌嗪 ‑2,5‑二基)双 (丁烷‑4,1‑二基)]双(氮杂三基)}四(乙烷 ‑2,1‑二基)(9Z,9'Z,9 ”Z,9”'Z,12Z,12'Z,12 ”Z, 12”'Z)‑四(十八‑9,12‑二烯酸酯)、 { [(3,6‑二氧代哌嗪 ‑2,5‑二基)双(丁烷 ‑4,1‑二基)]双 (氮杂三基)}四(丁烷 ‑4,1‑二基)(9Z,9'Z,9 ”Z,9”'Z,12Z,12'Z,12 ”Z,12”'Z)‑四(十八‑9, 12‑二烯酸酯)、 N1,N3,N5 ‑三[3‑(双十二烷基氨基)丙基]苯 ‑1,3,5‑三甲酰胺(TT3)、 9,9', 9”,9”',9” ”,9” ”'‑{[(苯并‑1,3,5‑三酰胺基)三(丙烷 ‑3,1‑二基)]三氮杂三基 }六壬酸六 (辛烷‑3‑基)酯(FTT5)中的一种或多种， 优选4 ‑(N,N‑二甲基氨基)丁酸(二亚油基)甲酯、 8 ‑ [(2‑羟乙基)(6 ‑氧代‑6‑癸氧基己基)氨基 ]辛酸(十七烷 ‑9‑基)酯或[(4 ‑羟基丁基)氮杂二 基]双(己烷 ‑6,1‑二基)双(2 ‑己基癸酸酯)中的一种或几种； 所述中性脂质选自DOPE、 DOPC、 DOP S和DMPC中的一种或多种， 优选为D SPC和/或DOPE； 所述PEG化脂质选自1,2 ‑二肉豆蔻酰 ‑rac‑甘油‑3‑甲氧基聚乙二醇2000、 2 ‑[(聚乙二 醇)‑2000]‑N,N二十四烷基乙酰胺、 1,2 ‑二硬脂酰 ‑rac‑甘油‑3‑甲氧基聚乙二醇2 000(DSG‑ PEG2000)或n ‑(羰基‑甲氧基聚乙二醇2000) ‑1,2‑二硬脂酰 ‑sn‑甘油‑3‑磷脂酰乙醇胺钠盐 中的一种或几种， 优选为1,2 ‑二肉豆蔻酰 ‑rac‑甘油‑3‑甲氧基聚乙二醇2000和/或2 ‑[(聚 乙二醇)‑2000]‑N,N二十四烷基乙酰胺。 4.根据权利要求2所述的一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒， 其特征在于， 基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒中， 所述脂质材料中还允许包括胆固醇， 可电离 的阳离子脂质、 中性脂质、 科罗索酸或其类似物、 胆固醇、 PEG化脂质的摩尔比为(10～70)：权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114306279 A 2(2～30)： (10～70)： (0～6 0)： (0.1～10)， 优选为5 0： 10： 35～49.9： 0～ 20： 0.1～5； 当胆固醇摩尔 量为0表示所述脂质材料中不包括胆 固醇， 当胆 固醇摩尔 量不为0表示所 述脂质材 料中包括胆固醇。 5.权利要求1 ‑4中任一项所述基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒在制备药物递 送载体中的应用。 6.一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒系统， 其特征在于， 包括如权利要求 2‑4中任一项 所述的基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒， 以及 包载的核酸药物， 所述 基于科罗索酸 或其类似物的脂质纳米颗粒和核酸药物的氮/磷比为1： 10～10： 1， 优选3： 1～ 6： 1。 7.根据权利要求6所述的一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒系统， 其特征 在于， 所述核酸药物包括RNA药物、 DNA药物、 质粒中的任意一种， 优选RNA药物， 进一步优选 siRNA和mRNA。 8.根据权利要求6所述的一种基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒系统， 其特征 在于， 基于科罗索酸 或其类似物的脂质纳米颗粒系统的平均粒径 为50～150nm， 优选为80～ 100nm。 9.一种如权利要求6所述基于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒系统的制备方法， 其特征在于， 选择以下 方法中的任意 一种或两种： (1)快速混合法： 将脂质材料、 科罗索酸或其类似物溶于乙醇中， 得到的乙醇溶液与溶 有核酸药物的水性溶液快速混合， 即得NC/xLNP悬液， 用水性介质稀释NC/xLNP悬液， 并通过 切向流过滤、 透析或超 滤手段对NC/xLNP进 行纯化和浓缩， 得到基于科罗索酸 或其类似物的 脂质纳米颗粒系统； (2)微流控合成法： 使用微流控设备和配套芯片， 将核酸药物水性溶液与溶有脂质材料 与科罗索酸或其类似物的乙醇溶液混合， 收集得到的NC/xLNP溶液， 用水性介质稀释， 使乙 醇浓度小于0.5％， 并通过切向流过滤、 透析或超滤手段对NC/xLNP进行纯化和浓缩， 得到基 于科罗索酸或其类似物的脂质纳米颗粒系统； (3)T型接头合成法： 使用T型接头， 将核酸药物水性溶液与溶有脂质材料和科罗索酸或 其类似物的乙醇溶液混合， 形成NC/xLNP， 用水性介质将NC/xLNP稀释， 使乙醇浓度小于 0.5％， 并通过切向流过滤、 透析或超 滤手段对NC/xLNP进行纯化和浓缩， 得到基于科罗索酸 或其类似物的脂质纳米颗粒系统； (4)冷冻干燥法： 采用快速混合法、 微流控合成法、 T型接头合成法等常规LNP制备方法 制得NC/xLNP后